細胞離心機離心分離純化法可以避免二次污染
細胞離心機通過離心技術使得細胞分離,是一種物質分離,不通過介質,就不出現二次污染。
細胞離心機采用的就是離心分離純化法:
離心方法,包括差速離心法和密度梯度離心法,密度梯度離心法又分為速度-區(qū)帶密度梯度離心法和等密度梯度離心法。在選用合理的方法對細胞或組織進行破碎后,首先要進行差速離心法,即根據不同離心速度所產生的不同離心力將各種細胞組分和顆粒分離開來。各種細胞器和顆粒典型的差速離心順序見下表。
細胞離心機是利用離心力對混合液(含有固形物)進行分離和沉淀的一種專用儀器。細胞離心機有低速、高速離心機和低速、細胞離心機,以及超速分析、制備兩用冷凍離心機等多種型號。而細胞離心機是帶制冷系統的高速離心機。這種離心機的離心腔溫度通??山抵亮銛z氏度以下。轉速可達10000rpm以上,具有冷凍離心機的性能和結構外,細胞離心機所用角式轉頭多采用用鈦合金或鋁合金制成。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料制品。這類離心機多用于收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。那么,操作細胞離心機需要重點關注的問題有哪些呢?
操作細胞離心機需要注意的事項:
1.離心管內裝載的溶液量必須合適,不銹鋼管無蓋,只能裝2/3,塑料管可裝至肩部。管蓋必須蓋嚴絕不允許漏液??展茈x心會變形。塑料管使用有機溶劑必須符合規(guī)定。
2.離心管必須成對放置,必須嚴格平衡,偏差<0.1g。
3.不允許無轉頭空轉,放取轉頭必須用手柄,以防轉頭滑落。轉頭要輕放、卡穩(wěn),旋下手柄時要用手扶住手柄只轉轉頭。轉頭蓋要蓋嚴,無蓋不準離心。
4.細胞離心機離心時不準打開機蓋,不準扒扶在離心機上,如有異常聲音和振動時立即停機。
5.轉頭使用后必須及時由轉頭室中取出、擦干,用擦孔棒將管孔仔細擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈,擦凈轉頭室內凝水,開門涼干轉頭室。
6.使用離心機必須預約,用后必須登記。
7.未經過培訓和考核者不能使用。
8.選擇合適的轉頭和轉速,絕不可超速使用。
9.選擇合適的溫度,通常4℃,除有機溶劑外不要低于零下,以免冰凍,損壞離心管和轉頭。
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