淺談離心時間對分離效果的影響
發布時間:2015-10-9 16:12:51??????點擊:
對于離心機的分離效果,我們常常會考慮離心機種類,離心方法,離心介質等因素,但是在實際操作中,除了以上幾點,離心機轉速和離心時間以及離心介質的PH值和溫度等條件也是很重要的,下面小編就為大家詳細介紹一下后面三種因素對于分離效果的影響。
1、離心時間
離心時間是影響離心效果十分重要的一個因素,離心方法的不同所需要的離心時間也會不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,詳細介紹。對于差速離心來說,離心時間指的是某種顆粒完全沉降到離心管底的時間;而對于等密度梯度離心來說,離心時間則是指顆粒完全到達等密度點的平衡時間;最后一個密度梯度離心的離心時間指的是形成界限分明的區帶的時間。對于后面兩種離心方法,其所需的區帶形成時間或平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗后確定。
2、離心轉速
離心機的轉速的大小主要由轉子的轉速和顆粒的旋轉半徑來決定,在說明離心條件時,往往也用相對離心力場來表示。實際工作中,離心力場的數據是指其平均值。即是指在離心溶液中點處顆粒所受的離心力場。
3、離心介質的PH值和溫度
離心介質的PH值的設定一般是處于酶穩定的PH范圍內,可采用緩沖液,在試驗過稱重,要避免過酸或者過堿的環境對離心機本身產生腐蝕作用。
我們在利用離心機工作時,除了要格外注意對離心介質的選擇之外,還要控制好溫度及介質溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質的凝集、變性和失活。一般來說,我們將離心溫度會控制在4℃左右,對于某些熱穩定性較好的酶等,離心也可在室溫下進行。
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1、離心時間
離心時間是影響離心效果十分重要的一個因素,離心方法的不同所需要的離心時間也會不同。下面以差速離心和等密度梯度離心以及密度梯度離心為例,詳細介紹。對于差速離心來說,離心時間指的是某種顆粒完全沉降到離心管底的時間;而對于等密度梯度離心來說,離心時間則是指顆粒完全到達等密度點的平衡時間;最后一個密度梯度離心的離心時間指的是形成界限分明的區帶的時間。對于后面兩種離心方法,其所需的區帶形成時間或平衡時間,影響因素很復雜,可通過試驗后確定。
2、離心轉速
離心機的轉速的大小主要由轉子的轉速和顆粒的旋轉半徑來決定,在說明離心條件時,往往也用相對離心力場來表示。實際工作中,離心力場的數據是指其平均值。即是指在離心溶液中點處顆粒所受的離心力場。
3、離心介質的PH值和溫度
離心介質的PH值的設定一般是處于酶穩定的PH范圍內,可采用緩沖液,在試驗過稱重,要避免過酸或者過堿的環境對離心機本身產生腐蝕作用。
我們在利用離心機工作時,除了要格外注意對離心介質的選擇之外,還要控制好溫度及介質溶液的PH值等離心條件,防止其分離物質的凝集、變性和失活。一般來說,我們將離心溫度會控制在4℃左右,對于某些熱穩定性較好的酶等,離心也可在室溫下進行。
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